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PCR篇-耗材選擇
發(fā)布日期：2022/10/18 9:56:38
PCR 耗材為什么一般都是PP材質(zhì)的呢？
因為PCR/qPCR耗材通常會與試劑或樣品直接接觸，而聚丙烯（PP）材質(zhì)是生物學(xué)惰性材料，表面不易于粘附生物分子，且有著良好的化學(xué)耐性，及溫度耐受性（可以121℃ 高壓滅菌，也可以承受熱循環(huán)過程中的溫度變化）。
不同體積的PCR管/板，我該怎么選呢？
選擇宗旨：依據(jù)具體的實驗要求選用合適的產(chǎn)品。PCR管的體積大多數(shù)都可以滿足PCR反應(yīng)的要求。在此基礎(chǔ)上，推薦優(yōu)先選用低容管。因為低容反應(yīng)管/板有著較小的上方空間，可提高熱傳導(dǎo)率并降低蒸發(fā)。同時，在加樣時需要避免加樣過量或過少。過量會導(dǎo)致熱傳導(dǎo)率下降，溢出及交叉污染，而過少可能會造成樣品蒸發(fā)損失。
常見反應(yīng)管的規(guī)格及體積：
單管/聯(lián)管：0.5mL，0.2mL，0.15mL
96孔板：0.2mL，0.15mL
384孔板：0.04mL

樣品量較少時，我會選單管或者聯(lián)管，但是為什么有的是平蓋，有的是凸蓋呢？

當(dāng)樣品量較少時，都會優(yōu)先選用單管或者聯(lián)管。但是當(dāng)反應(yīng)體積需求較大時，單管占優(yōu)勢，體積可達0.5mL。而平蓋和凸蓋各有優(yōu)點，具體可參考下面的信息。

不同顏色的PCR管/板，我該怎么選呢？
對于普通的PCR反應(yīng)選用透明或者彩色的PCR管都是可以的，而彩色透明的PCR管更有助于進行樣品分類管理。
但qPCR更推薦選用優(yōu)質(zhì)的白色PCR耗材。由于qPCR需要實時定量檢測熒光信號強度，更需要靈敏、精確的熒光信號傳遞。實驗證明，與傳統(tǒng)的透明PCR產(chǎn)品相比，白色PCR產(chǎn)品可最大程度地反射熒光信號，減少孔間信號交叉污染，可優(yōu)化實時熒光定量PCR的結(jié)果。

我之前買的PCR板/管材質(zhì)厚度不一，是不是厚點的穩(wěn)定性更好呢？
不是的，管壁厚度會直接影響熱傳導(dǎo)率，極薄的壁厚可優(yōu)化熱傳遞減少循環(huán)時間。要想提升PCR反應(yīng)效率，保證反應(yīng)穩(wěn)定高效進行，均一、超壁薄的PCR耗材才是不二之選。
對于96孔或者384孔板，為什么有的有裙邊，有的沒有呢？
其實PCR/qPCR板的裙邊是為了更好地適應(yīng)自動化應(yīng)用，可為儀器提供穩(wěn)定的支持和機械耐受強度，且移液過程中的穩(wěn)定性也會更高。
PCR板一般分為無裙邊、半裙邊、全裙邊。
無裙邊板：可適用于大多數(shù)的PCR儀或qPCR儀，但不適用于自動化應(yīng)用。移液過程中穩(wěn)定性不高，需要配合板托使用。
半裙邊板：可適配標(biāo)簽或應(yīng)用條碼，及自動化應(yīng)用，且有著較好的移液穩(wěn)定性。
全裙邊板：非常適用于自動化實驗應(yīng)用，也可適配標(biāo)簽及應(yīng)用條碼。機械強度較好，可適用于凸出模塊的PCR儀，且移液過程中穩(wěn)定性高。
對于96孔或者384孔板，為什么切角和標(biāo)識都不是很相同呢？
這是由切角和標(biāo)識的作用決定的。
切角：PCR板的切角位置選擇取決于適配儀器要求，便于定位。

標(biāo)識：PCR板的數(shù)字字母標(biāo)記有助于識別單個孔及樣品位置。一般為凸出的顏色數(shù)字標(biāo)識或者印刻標(biāo)識。對于一些自動化應(yīng)用實驗，印刻標(biāo)記的反應(yīng)板密封性會更好。

為什么有的PCR板孔是凸出的，有的卻是平的呢，哪個更好？
適合的才是最好的。常見的PCR板有平孔緣和加高孔緣兩種。
平孔緣的反應(yīng)板，可適用于大多數(shù)的PCR儀。
升孔緣的反應(yīng)板，便于封膜，可降低樣品間的交叉污染風(fēng)險。

PCR封板膜有好多種類型，哪種實驗效果更好呢？
根據(jù)具體的PCR實驗要求選用適配的高質(zhì)量封板膜，不僅能有效地保護樣品，防止污染，還可以提供可信賴的實驗檢測數(shù)據(jù)。

提供溫度耐受性和密封性強、高透明度、操作簡便的高質(zhì)量PCR/qPCR膜。

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