關(guān)于酶標(biāo)儀
發(fā)布日期：2022/9/7 17:55:13
酶標(biāo)儀（Microplate Reader）是對(duì)酶聯(lián)檢測(cè)（EIA）實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)反應(yīng)是通過(guò)偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的，反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示，通過(guò)顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。
酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相的專用光電比色計(jì)或分光光度計(jì)，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。
光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過(guò)濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測(cè)標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過(guò)標(biāo)本照射到光電檢測(cè)器上，光電檢測(cè)器將這一待測(cè)標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號(hào)。電信號(hào)經(jīng)前置放大，對(duì)數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算，最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。
微處理機(jī)還通過(guò)控制電路控制機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動(dòng)來(lái)移動(dòng)微孔板，從而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)過(guò)程。而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動(dòng)微孔板進(jìn)行檢測(cè)，因此省去了X，Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡(jiǎn)單。
微孔板是一種經(jīng)事先包理專用于放置待測(cè)樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體，微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液。其常見(jiàn)規(guī)格有40孔板，55孔板，96孔板等多種，不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板，對(duì)其可進(jìn)行一孔一孔的檢測(cè)或一排一排的檢測(cè)。
酶標(biāo)儀所用的單色光既可通過(guò)相干濾光片來(lái)獲得，也可用分光光度計(jì)相同的單色器來(lái)得到。在使用濾光片作濾波裝置時(shí)與普通比色計(jì)一樣，濾光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，其效果是相同的。光源燈發(fā)出的光經(jīng)聚光鏡，光柵后到達(dá)反射鏡，經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過(guò)比色溶液，然后再經(jīng)濾光片送到光電管。
酶標(biāo)儀有單通道和多通道兩種類型，單通道又分為自動(dòng)型和手動(dòng)型兩種。其中，自動(dòng)型的儀器設(shè)有X和Y兩個(gè)方向的驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)，在機(jī)械裝置的驅(qū)動(dòng)下，微孔板上的小孔一個(gè)個(gè)依次進(jìn)入光束下面測(cè)試。手動(dòng)型靠手移動(dòng)微孔板來(lái)進(jìn)行測(cè)量。
在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上，又發(fā)展了多通道、全自動(dòng)型酶標(biāo)儀。多通道酶標(biāo)儀一般都是自動(dòng)型的，它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測(cè)器。如8通道的儀器，設(shè)有8條光束（或8個(gè)光源）、8個(gè)檢測(cè)器和8個(gè)放大器。在機(jī)械驅(qū)動(dòng)裝置的作用下，樣品被8個(gè)一排、8個(gè)一排檢測(cè)。多通道酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度快，但其結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，價(jià)格也較貴，多用于大中型醫(yī)院。
酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中，特別在近幾年中，由于大量的酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用，使得酶標(biāo)儀在繁殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來(lái)越廣泛，同時(shí)促進(jìn)了繁殖健康技術(shù)水平提高。目前在國(guó)內(nèi)血站臨床試驗(yàn)室中酶標(biāo)儀成為ELISA測(cè)定的重要工具。在農(nóng)業(yè)中利用酶標(biāo)儀研究酚氧化酶，為開發(fā)以該酶為靶標(biāo)的新型害蟲控制劑提供理論依據(jù)。伏馬菌素是最近發(fā)現(xiàn)的一族主要由幾種真菌產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)相關(guān)的毒素代謝產(chǎn)物，該毒素已被世界衛(wèi)生組織列為近年來(lái)首先進(jìn)行研究的幾種霉菌毒素之一。因此快速、高效的檢測(cè)伏馬菌素便顯得尤為重要。在450nm或630nm的濾鏡下使用酶標(biāo)儀對(duì)微孔板進(jìn)行光學(xué)測(cè)量，可以檢測(cè)伏馬菌素的含量，在食品安全方面有著重要的應(yīng)用。生長(zhǎng)曲線一般指菌落總數(shù)CFU/mI?；蛘呔淇倲?shù)的對(duì)數(shù)log CFU/ml。隨時(shí)間變化曲線，可用來(lái)展示微生物生長(zhǎng)情況和新陳代謝規(guī)律。目前通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)定菌懸液時(shí)存在即時(shí)性差、操作繁瑣、易污染等缺點(diǎn)，由于酶標(biāo)儀是一種快速、準(zhǔn)確、高通量的儀器，所以我們總會(huì)選擇使用酶標(biāo)儀來(lái)進(jìn)行菌懸液OD值的測(cè)定，來(lái)提高工作效率，節(jié)約時(shí)間。
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